شناسایی مولکولی ژن فسفوگلیسرات کیناز از مواد دفعی- ترشحی انگل توکسوکارا کنیس
نویسنده
چکیده مقاله:
انگل توکسوکارا کنیس گسترش جهانی دارد و علت اصلی بیماری مشترکی بین انسان و دام است که توکسوکاریوز نامیده میشود. عفونت در انسان عمدتاً در اطفال متعاقب بلع تصادفی تخم انگل جنیندار که در خاک وجود دارد و یا از طریق غذا و دستهای آلوده اتفاق میافتد. در این پژوهش، آغازگرهای اختصاصی برای ژن کد کننده فسفوگلیسرات کیناز از انگل توکسوکارا کنیس با استفاده از (Expressed sequence tag) EST موجود در بانک ژن (با شماره دسترسی HO348231)، طراحی گردید و سپس با استفاده از تکنیک Semi-Nested RT-PCR آن قطعات ژنی تکثیر گردیدند. قطعهی ژن کد کنندهی فسفوگلیسرات کیناز با موفقیت تکثیر و به منظور شناسایی ملکولی در پلاسمید pMALc2x همسانهسازی گردید. مجموع کل RNA از نمونهها استخراج و سپس به منظور ساخت cDNA، از آن به عنوان رونوشت و از الیگو (dT) به عنوان آغازگر استفاده گردید. در ادامه پس از بهینهسازی شرایط PCR، قطعه ژنی به طول 304 نوکلئوتید تکثیر گردید و به منظور تسهیل در امر همسانهسازی محصول RT-PCR و وکتور pMAL، به وسیلهی آنزیمهای محدودالاثر BamHI و HindIII هضم شده و سپس توسط آنزیم لیگاز به یکدیگر متصل شدند. پلاسمید نوترکیب به دست آمده جهت تکثیر به باکتری E.coli سوش BL21 منتقل و توالی آن بررسی گردید. توالی 304 نوکلئوتیدی به دست آمده قطعهی پروتئینی حاوی 101 اسید آمینه با وزن ملکولی 497/10 کیلو دالتون و نقطهی ایزو الکتریک 5 را کد میکند. مقایسهی این ژن با ژنهای مشابه از دیگر نماتودها، دامینی به نام "Phosphoglycerate kinase superfamily" را نشان داد. همترازی توالی به دست آمده نشان داد که این ژن با ژن فسفوگلیسرات کیناز از انگل Ascaris suum، 95 درصد مشابهت دارد. مشابه این ژن با نماتودی دیگر به نامBrugia malayi و همچنین فیلاریایی به نام loa loa 85 درصد همخوانی دارد.
منابع مشابه
استخراج آنتی ژن های دفعی- ترشحی انگل توکسوپلاسما گوندی در طراحی کیت الایزا اویدیتی (Elisa avidity)
Background and purpose: One of the transmission ways of the congenital toxoplasmosis is through the placenta to the fetus, therefore, its diagnosis at early stage is very important. Toxoplasma gondii parasite contains various antigens of which excretory-secretory antigens (E/SA) are used in designing Elisa avidity kit. The aim of this study was to compare the results of commercial kit and desig...
متن کاملسیر حرکت انگل توکسو پلاسما گوندیی در اندامهای مختلف بدن موشBalb/cپس از ایمونیزاسیون با آنتی ژن های دفعی ترشحی
Background and Purpose: Toxoplasma gondii is an obligatory intracellular parasite in different cells of human beings and animals. The aim of this study was to evaluate presence and movement trend of T. gondii tachyzoites in different tissues of Balb/c, after immunization with Excretory Secretory Antigens (ESA). Materials and Methods This experimental survey has been performed on 24 Balb/c mice...
متن کاملتهیه، تخلیص و شناسایی اجزاء آنتی ژن های دفعی – ترشحی تاکی زوئیتهای توکسوپلاسماگوندی سویه RH
متن کامل
استخراج آنتی ژن های دفعی- ترشحی انگل توکسوپلاسما گوندی در طراحی کیت الایزا اویدیتی (elisa avidity)
سابقه و هدف: یکی از راه های انتقال بیماری توکسوپلاسموزیس مادرزادی از طریق جفت به جنین می باشد که تشخیص این بیماری را در این مرحله بسیار حائز اهمیت می نماید. انگل توکسوپلاسما دارای آنتی ژن های متعددی می باشد که از آنتی ژن های دفعی- ترشحی آن در طراحی کیت الایزا اویدیتی استفاده می شود. هدف از انجام این مطالعه بررسی مقایسه ای کیت آماده و طراحی شده الایزا اویدیتی در مادران مبتلا به توکسوپلاسموزیس می...
متن کاملتوکسوپلاسما گونده یی: مروری بر آنتی ژن های دفعی-ترشحی
Toxoplasma gondii is an obligatory intracellular protozoan that infects all warm-blooded vertebrates. Almost one-third of people throughout the world are infected by this parasite. Although toxoplasmosis is often lethal in HIV/AIDS patients, neoplastic disease, bone marrow or heart transplant recipients, it results in life-long protective immunity in healthy people. Hence, different antigens of...
متن کاملتهیه، تخلیص و شناسایی اجزاء آنتی ژن های دفعی – ترشحی تاکی زوئیت های توکسوپلاسماگوندی سویه rh
خلاصهسابقه و هدف: مطالعات قبلی نشان داده است که آنتی ژن های دفعی – ترشحی (e/sa) تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گوندی می توانند نقش مهمی دربیماری زایی, مصونیت میزبان در برابر آلودگی مجدد به انگل, تشخیص و افتراق مرحله حاد از مزمن توکسوپلاسموز داشته باشند. برای بررسی دقیق تر موارد فوق نیاز به اجزاء تخلیص شده این آنتی ژن ها می باشد. بنابراین هدف مطالعه حاضر تهیه, تخلیص و شناسایی اجزاء تشکیل دهنده این آ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 10 شماره 4
صفحات 20- 32
تاریخ انتشار 2014-12-01
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023